PhD, Rongbao Zhao.

El transportador de folato acoplado a protones (PCFT), un miembro (SLC46A1) de la superfamilia de transportadores de solutos, transporta folatos a las células utilizando el gradiente de protones como fuente de energía. Desempeña funciones esenciales en la absorción intestinal de folatos en la membrana del borde en cepillo del yeyuno proximal y en el transporte de folatos a través del plexo coroideo hacia el líquido cefalorraquídeo. Por lo tanto, las mutaciones de pérdida de función en el gen PCFT dan lugar a un trastorno autosómico recesivo poco frecuente, la malabsorción hereditaria de folato (HFM). El PCFT también se expresa en gran medida en una variedad de carcinomas, donde transporta antifolatos a las células cancerosas dentro del microambiente ácido de los tumores. Entre los antifolatos, el pemetrexed tiene la mayor afinidad por el PCFT. La expresión del PCFT se asocia positivamente con la eficacia del pemetrexed en el tratamiento del mesotelioma pleural. La investigación en curso se centra en dos áreas.

1. Caracterización de la relación estructura-función de este transportador e identificación de los residuos de aminoácidos que juegan un papel clave en su función. El método de accesibilidad de cisteína sustituida (SCAM) se utiliza para caracterizar la accesibilidad de los residuos dentro de los dominios transmembrana y para definir la vía de translocación acuosa. Se prestará especial atención a los residuos que están involucrados en la unión de protones, acoplamiento de protones, compuerta extracelular, unión del sustrato de folato y bloqueo/desbloqueo del transportador. Se utilizarán modelos de homología de PCFT para comprender las ramificaciones estructurales de los estudios funcionales en ausencia de una estructura cristalina de esta proteína.
2. Detección de nuevas mutaciones de pérdida de función del gen PCFT en pacientes con malabsorción hereditaria de folato (HFM). Se amplificarán y secuenciarán los ADN genómicos que cubren los exones del gen PCFT. Se identificarán nuevas mutaciones y se caracterizarán los mecanismos subyacentes para el transporte defectuoso de folato. Estos hallazgos complementarán la comprensión de la relación entre la estructura y la función del gen PCFT.

Aluri, S., Zhao, R., Lin, K., Shin, DS, Fiser, A. y Goldman, ID (2019) Sustituciones que bloquean y desbloquean el transportador de folato acoplado a protones (PCFT-SLC46A1) en una conformación abierta hacia adentro. J. Biol. Chem. 294, 7243-7258

Aluri, S., Zhao, R., Fiser, A. y Goldman, ID (2018) La accesibilidad y la reticulación de la cisteína sustituida identifican una hendidura exofacial en las hélices 7(a) y 8(a) del transportador de folato acoplado a protones (SLC46A1). Am. J. Physiol Cell Physiol 314, C289-C296

Zhao, R., Najmi, M., Aluri, S., Spray, DC y Goldman, ID (2018) Transporte concentrativo de antifolatos mediado por el transportador de folato acoplado a protones (SLC46A1); aumento mediante un tampón HEPES. Mol. Pharmacol. 93, 208-215

Aluri, S., Zhao, R., Lubout, C., Goorden, SMI, Fiser, A. y Goldman, ID (2018) Malabsorción hereditaria de folato debido a una mutación en la compuerta externa del transportador de folato acoplado a protones-SLC46A1. Blood Advances 2, 61-69

Zhao, R., Najmi, M., Aluri, S. y Goldman, ID (2017) Impacto de las modificaciones postraduccionales de las cisteínas modificadas genéticamente en el método de accesibilidad de la cisteína sustituida; evidencia de glutatión. Am. J. Physiol Cell Physiol 312, 517-526

Najmi, M., Zhao, R., Fiser, A. y Goldman, ID (2016) Función de los residuos de triptófano en la función del transportador de folato acoplado a protones (PCFT-SLC46A1). Am. J. Physiol Cell Physiol 311, C150-C157

Zhao, R., Najmi, M., Fiser, A. y Goldman, ID (2016) Identificación de una puerta extracelular para el transportador de folato acoplado a protones (SLC46A1) mediante reticulación de cisteína. J. Biol. Chem. 291, 8162-8172

Zhao, R., Visentin, M. y Goldman, ID (2015) Determinantes de las actividades de los antifolatos que se introducen en las células mediante endocitosis mediada por el receptor de folato. Cancer Chemother. Pharmacol. 75, 1163-1173

Visentin, M., Unal, ES, Najmi, M., Fiser, A., Zhao, R. y Goldman, ID (2015) Identificación de residuos de Tyr que mejoran la unión del sustrato de folato y restringen la oscilación del transportador de folato acoplado a protones (PCFT-SLC46A1). Am. J. Physiol Cell Physiol 308, C631-C641

Zhao, R., Diop-Bove, N. y Goldman, ID (2014) Endocitosis y citotoxicidad mediadas por receptores mejoradas de un conjugado de ácido fólico-monohidrazida de desacetilvinblastina en una línea celular resistente a pemetrexed que carece de transportadores facilitadores específicos de folato pero con una mayor expresión del receptor de folato. Mol Pharmacol. 85, 310-321